熒光定量PCR儀的工作原理是基于聚合酶鏈反應技術和熒光探針技術相結合的一種檢測方法。它通過實時監(jiān)測熒光信號的變化，實現(xiàn)對目標DNA的定量分析。
 

　　熒光定量PCR儀的核心部分是熒光探針。熒光探針是一種能夠特異性地與目標DNA序列結合的短片段核酸，其兩端分別標記有熒光基團和猝滅基團。當熒光探針與目標DNA結合時，熒光基團發(fā)出的熒光被猝滅基團吸收，使得熒光信號減弱。
 

　　通過實時監(jiān)測熒光信號的變化，將熒光信號強度與PCR循環(huán)次數(shù)相對應，從而繪制出熒光信號曲線。在PCR反應初期，熒光信號較弱；隨著反應的進行，熒光信號逐漸增強；當達到一定循環(huán)次數(shù)時，熒光信號趨于穩(wěn)定。通過分析熒光信號曲線，可以確定目標DNA的數(shù)量。
 

　　熒光定量PCR儀的主要優(yōu)點有以下幾點：
 

　　1、實時性：與傳統(tǒng)的終點法PCR相比，它可以在反應過程中實時監(jiān)測熒光信號的變化，無需等待反應結束后再進行分析。
 

　　2、高靈敏度：由于熒光探針具有高度特異性，可以檢測到非常低濃度的目標DNA。
 

　　3、高準確性：通過實時監(jiān)測熒光信號的變化，可以精確地計算出目標DNA的數(shù)量，避免了傳統(tǒng)終點法PCR中的誤差累積。
 

　　4、高通量：還可以同時對多個樣本進行分析，大大提高了檢測效率。
 

　　5、操作簡便：操作過程相對簡單，只需設置好相應的參數(shù)即可自動完成實驗。
 

　　總之，熒光定量PCR儀通過結合PCR技術和熒光探針技術，實現(xiàn)了對目標DNA的實時、高靈敏度、高準確性的定量分析，廣泛應用于生物醫(yī)學研究、病原體檢測、基因表達分析等領域。